Como a hemólise afeta seus resultados laboratoriais

A hemólise é um fenômeno amplamente estudado na medicina laboratorial, pois pode comprometer a precisão dos exames e levar a diagnósticos incorretos. Neste artigo, abordaremos desde a definição do processo hemolítico até seu impacto nas análises clínicas e estratégias para minimizar sua ocorrência.

O que é hemólise?

A hemólise é a ruptura dos eritrócitos/hemácias (glóbulos vermelhos), resultando na liberação da hemoglobina e outros componentes intracelulares no plasma ou soro sanguíneo. Esse processo pode ocorrer in vivo, devido a condições patológicas, ou in vitro, quando a ruptura ocorre durante a coleta, armazenamento ou manipulação da amostra no laboratório.

A presença de hemólise interfere em diversos exames laboratoriais, principalmente aqueles que utilizam soro ou plasma, já que os componentes celulares liberados podem reagir com reagentes analíticos, alterar concentrações de biomarcadores e comprometer a interpretação dos resultados.

Causas

Pode ser desencadeada por diversos fatores, que podem ser divididos em causas pré-analíticas, analíticas e pós-analíticas:

1. Causas Pré-Analíticas (Hemólise In Vitro)

O principal fator de interferência laboratorial ocorre durante a fase pré-analítica, incluindo:

• Coleta inadequada: Uso de agulhas de diâmetro muito fino (calibres elevados) pode gerar pressão excessiva nos eritrócitos, provocando a ruptura.
• Aspiração excessiva do sangue: O uso de seringas com pressão negativa exagerada pode causar lise celular.
• Transporte inadequado da amostra: Agitação vigorosa do tubo de ensaio pode danificar as membranas celulares.
• Uso de anticoagulantes inadequados: Alguns anticoagulantes, como EDTA em excesso, podem causar fragilidade osmótica e hemólise.
• Armazenamento impróprio: Exposição da amostra a temperaturas extremas ou tempos prolongados antes da centrifugação pode levar à degradação celular.

2. Causas analíticas e pós-analíticas

• Processamento inadequado da amostra: Centrifugação em velocidades inadequadas ou por tempo excessivo pode induzir hemólise.
• Reagentes incompatíveis: Alguns reagentes laboratoriais podem interagir com a membrana eritrocitária, causando lise.

Doenças e medicamentos relacionados (hemólise in vivo)

A hemólise in vivo está associada a condições patológicas e pode ser consequência de doenças hematológicas, autoimunes, infecciosas e metabólicas.

Principais doenças associadas:

• Anemias hemolíticas (hereditárias e adquiridas): Exemplo: Esferocitose hereditária, deficiência de G6PD e anemia falciforme.
• Doenças autoimunes: Anemia hemolítica autoimune por anticorpos quentes ou frios.
• Infecções: Malária e septicemia por Clostridium perfringens.
• Doenças hepáticas e renais: Insuficiência hepática grave pode alterar a integridade eritrocitária.

Medicamentos que podem induzir hemólise:

• Dapsona e Primaquina: Associados a hemólise em pacientes com deficiência de G6PD.
• Cefalosporinas: Podem causar hemólise imune induzida por fármacos.
• Rifampicina: Associada a reações hemolíticas.

Como identificar a hemólise em amostras laboratoriais?

A identificação é feita visualmente e por meio de análises laboratoriais. Após a centrifugação, o plasma ou soro pode apresentar coloração rosada a avermelhada, dependendo da gravidade da hemólise.

A escala laboratorial de hemólise classifica a amostra de acordo com a intensidade da coloração:

Consequências laboratoriais

A hemólise pode interferir em diversas análises clínicas, principalmente naquelas que avaliam componentes bioquímicos do sangue.

1. Exames bioquímicos:

• Potasio (K+): Valores falsamente elevados (pseudohipercalemia).
• LDH e AST: Liberadas pelos eritrócitos, podendo gerar resultados artificialmente aumentados.
• Bilirrubina: Interferência óptica na espectrofotometria.

2. Exames hematológicos:

• Contagem de hemácias: Pode ser subestimada.
• Índices hematimétricos (VCM, HCM): Podem ser alterados devido à lise celular.

3. Exames imunológicos e de coagulação:

• Coagulograma: Hemólise pode afetar tempo de protrombina (TP) e tempo de tromboplastina parcial ativada (TTPA).
• Imunodosagens: A presença de hemoglobina livre pode interferir em leituras espectrofotométricas.

Boas práticas para evitar a hemólise

A adoção de protocolos rigorosos na fase pré-analítica reduz significativamente a incidência de hemólise in vitro. Algumas recomendações incluem:

• Utilizar agulhas de calibre adequado para coleta venosa.
• Evitar aspiração excessiva do sangue com seringas.
• Homogeneizar suavemente os tubos com anticoagulante.
• Realizar centrifugação adequada, evitando velocidades excessivas.
• Transporte das amostras sem agitação brusca.